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蛋白質(zhì)快速測(cè)定儀的使用過(guò)程中,需要注意以下幾點(diǎn),才能夠很大程度提升測(cè)定的準(zhǔn)確度。
1.樣品應(yīng)盡量選取具有代表性的,大塊的固體樣品應(yīng)用粉碎設(shè)備打得細(xì)小均勻,液體樣要混合均勻。
2.稱(chēng)量放入燒瓶時(shí),應(yīng)小心,不要讓樣品粘附在燒瓶的頸部,否則會(huì)使頸部上粘附的含氮化合物在無(wú)硫酸存在的情況下未消化*而造成氮損失。如果樣品粘附在頸部,直接造成測(cè)定將誒過(guò)的不準(zhǔn)確,會(huì)使結(jié)果偏小。
3.消化過(guò)程中不要用強(qiáng)火,特別是樣品脂肪或糖含量較高時(shí),消化過(guò)程中易產(chǎn)生大量泡沫,強(qiáng)火會(huì)使樣品溢出瓶外或?yàn)R起粘附在凱氏燒瓶壁上無(wú)法消化*而造成氮損失,因此應(yīng)在開(kāi)始消化時(shí)用小火加熱,保持和緩沸騰,使火力集中在凱氏燒瓶底部。
4.消化過(guò)程中要不時(shí)轉(zhuǎn)動(dòng)燒瓶,以便利用冷凝酸液將附在瓶壁上的固體殘?jiān)聪虏⒋龠M(jìn)其消化*。
5.消化時(shí)間要掌握好,時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)引起氨的損失;消化時(shí)間不夠,消化不*也會(huì)導(dǎo)致總氮量偏低。
6.樣品中脂肪含量過(guò)高時(shí),要增加硫酸的量,因消化時(shí)脂肪消耗硫酸量大,使硫酸缺少不能生成硫酸銨造成氮損失。
7.掌握好硫酸鉀與硫酸用量。硫酸鉀與硫酸用量的比值是消化成功的關(guān)鍵,它決定酸的沸點(diǎn),也決定消化所需的時(shí)間,硫酸鉀與硫酸兩者的比例適中,能夠大大提高消化效率。
8.消化至液體澄清透明后只需繼續(xù)加熱0.5h即可,加熱過(guò)久,硫酸不斷被分解,水分不斷逸出而使硫酸鉀濃度增大,沸點(diǎn)升高,易使已生成的銨鹽發(fā)生熱分解放出氨而造成損失,特別是蛋白質(zhì)含量低的食品因此而無(wú)法測(cè)定。